一、我国畜牧业面临的主要问题及如何利用微生物资源缓解上述问题
1、猪肉价格问题:饲料原料;猪难养
2、猪肉安全和品质问题:违规添加剂;肉质
3、粪便污染问题:污染物利用与处理
(一)开发微生物资源:
(1)开发微生物药物与保健品;
(2)微生物多糖
(3)、微生物免疫制剂:人工自动免疫制剂,人工被动免疫制剂;
(4)、微生物保健制品
(二)、微生物与能源生产:可再生的燃料(甲烷、乙醇和氢气),微生物利用有机废弃物生产,从而在获得清洁燃料的同时,处理了有机废物废水,保护和改善了环境。
二、与饲料产品相关的微生物
真菌:酵母菌:单细胞蛋白、霉菌毒素吸附剂;霉菌:发酵饲料(白地霉,根霉,酵母)、饲用抗生素(青霉菌等)、酶制剂(黑曲霉);细菌:乳酸菌(有机酸化剂,微生态制剂);双岐杆菌(微生态制剂);芽孢杆菌(微生态制剂);饲用抗生素(放线菌等)
藻类:单细胞蛋白质、保健品的生产(螺旋藻)
三、微生物的五种营养要素
1、碳源:在微生物生长过程中能为微生物提供碳素来源的物质
(1)无机C源:CO2、碳酸盐,只能被自养微生物利用
(2)有机C源:各种糖类,其次是有机酸、醇类、脂类和烃类化合物
2、氮源
分子态氮:固氮微生物以分子氮为唯一氮源
无机态氮:硝酸盐、铵盐。几乎所有微生物能利用
有机态氮:蛋白质及其降解产物
a速性氮源:实验室常用牛肉膏、蛋白胨、酵母膏做氮源b迟速性氮源:生产用玉米浆、豆饼、葵花饼、花生饼等
3、无机盐
大量元素:钠、钾、镁、钙、硫、磷等
微量元素:铁、锌、锰、钼、硒、钴、铜、硼等
4、生长因子
生长因子有维生素、氨基酸、嘌呤和嘧啶碱、卟啉及其衍生物、固醇、胺类等。
5、水
培养基的主要类型,常用的培养基
培养基:是人工配制的,适合微生物生长繁殖或产生代谢产物的营养基质
常见的`培养四大类微生物的培养基
细菌(牛肉膏蛋白胨培养基):
牛肉膏3g蛋白胨10gNaCl5gH2O1000ml放线菌(高氏1号)
淀粉20gK2HPO40.5gNaCl0.5gMgSO4.7H2O0.5gKNO31gFeSO40.01gH2O1000ml
酵母菌(麦芽汁培养基)
干麦芽粉加四倍水,在50℃--60℃保温糖化3-4小时,用碘液试验检查至糖化完全为止,调整糖液浓度为10波林,煮沸后,沙布过滤,调pH为6.0。
霉菌(查氏合成培养基)
NaNO33gK2HPO41gKCl0.5gMgSO4.7H2O0.5gFeSO40.01g蔗糖30gH2O1000ml
按成分不同划分:天然培养基、合成培养基、半合成培养基
按物理状态不同划分:固体培养基、半固体培养基、液体培养基按用途不同划分:基础培养基、加富培养基、选择培养基、鉴别培养基
1.选择性培养基
根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基
其功能是使混合菌样中的劣势菌变成优势菌,从而提高该菌的筛选效率。
2.鉴别性培养基
培养基中加有能与某一菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂,从而用肉眼就能使该菌菌落与外形相似的它种菌落相区分的培养基检查乳品和饮用水中是否含有肠道致病菌,所用的伊红美兰培养基,也是一种鉴别培养基。
将大肠杆菌接种在伊红-美兰培养基上,当大肠杆菌发酵乳糖时,能使伊红-美兰结合成黑色化合物,所以在这种培养基上长出来的大肠杆菌,呈紫黑色并带金属光泽的小菌落。
3、保藏菌种培养基:对于生产中使用的菌种保藏培养基,要求比较丰富的氮源,以防止菌种退化变质。
四、实验室微生物培养的常用方法
(一)固体培养
1.好氧菌:试管斜面、培养皿平板及较大型的克氏扁瓶、茄子瓶等的平板培养方法
2.厌氧菌:
(1)Hungate滚管技术
(2)厌氧罐
(3)高层琼脂柱
(4)厌氧工作站(厌氧篷)
(二)液体培养
1.好氧菌的培养
微生物只能利用溶于水中的氧,保证在培养液中有较高的溶解氧浓度就显得特别重要。
对好氧菌来说,生长的限制因子几乎总是氧的供应。
(1)浅层液体培养
(2)利用往复式或旋转式摇床
(3)发酵罐
2.厌氧菌的培养
厌氧体外发酵技术-产气法、分批培养和连续培养
细菌计数
1.总细胞计数法)
(1)血球计数板法:利用血球计数板,在显微镜下计算一定容积里样品中微生物的数量。
流式细胞术
(2)比浊法
2、活菌计数法稀释平皿计数
计数时稀释度的选择
1.只有一个稀释度平均菌落数在30~300个之间时,乘以稀释倍数报告。
2.两个稀释度平均菌落数在30~300个之间,则应求出两者总菌数之比,比值小于或等于2应报告平均数,大于2则报告其中较小的数字。
3.平均菌落数均多于300个,应按稀释度最高的平均菌落数
4.所有稀释度的平均菌落数均少于30个,则按稀释倍数最低的平均菌落数
生长曲线:在不补充营养物质或移去培养物,保持整个培养液体积不变条件下,以时间为横坐标,以菌数为纵坐标,根据不同培养时间时细菌数量的变化,可以作出一条反映细菌在整个培养期间菌数变化规律的曲线。