1、Fe3O4纳米粒子的表征
Fe3O4纳米粒子粒度分析
用激光散射仪（英国Malvern公司）测定Fe3O4纳米粒子粒径。从图3可见，本实验所制备的Fe3O4磁性粒子粒径主要分布在12～22 nm之间。说明磁性纳米粒子已经达到纳米级，且粒径分布较为集中，因此，可用于后续实验。
１.2 Fe3O4纳米粒子的氨基功能化表征
用红外光谱表征Fe3O4粒子表面氨基化修饰前后的变化。由图4可见，在Fe3O4粒子表面功能化修饰了氨基基团，Fe3O4粒子与氨基化Fe3O4粒子都具有Fe3O4粒子特征峰（58235 cm－1）；氨基化Fe3O4粒子具有SiO的伸缩振动特征峰（1409.675 cm－1）和氨基弯曲振动特征峰（1638.335 cm－1）。
１.3 酶复合磁性粒子的磁力测定
用振动样品磁强计（PAR115型）对移去磁铁而洗脱获得的酶复合磁性粒子进行磁力测量。复合粒子矫顽力较低，同时未见明显的剩磁和磁滞现象，其比饱和磁化强度σ仅为42.1 emu/g（图5）。由此可见，Fe3O4 /GOD复合粒子具有较强超顺磁性即在外磁场存在下有磁性，外撤除磁场则磁性消失，故可用于磁性分离。
２、酶电极的ECL行为
Fe3O4/GOD（a）和Fe3O4（b）粒子分别修饰的SPCE，在10 mL含0.1 mmol/L鲁米诺和1.0 mmol/L葡萄糖+0.1 mol/L硼酸钠缓冲溶液（pH= 8.0）中进行CV实验所得到ECL图（见图6）。实验条件：电位扫速为50 mV/s，扫描范围为0.2～1.4 V，采样速率10 T/S，放大倍数3。由图6可见，修饰在电极表面的Fe3O4粒子表面成功地共价固定了GOD，从而催化氧化葡萄糖生成鲁米诺ECL所需的H2O2。
3、缓冲液种类、pH值和温度的影响
研究了3种缓冲液： 0.1 mol/L硼酸钠、0.1 mol/L HAc?NaAc和PBS（pH=8.0）作为支持电解质的影响。结果表明，0.1 mol/L硼酸钠缓冲溶液中ECL响应最高。酶的催化活性受温度影响较大。本实验用集热式恒温加热磁力搅拌器控制水浴温度，考察了20～60 ℃范围内酶电极的电流响应。当温度达到40 ℃时，响应最大。综合考虑温度对葡萄糖氧化酶电极寿命的影响，本实验均在室温25 ℃下进行。
4、葡萄糖的'分析
取10 mL石英小烧杯，加入含一系列不同浓度的葡萄糖0.1 mol/L硼酸钠缓冲溶液（pH= 8.0）10 mL，此时鲁米诺浓度为0.5 mmol/L，按上述方法测定ECL的强度（图8）。葡萄糖在1×10－5～1.0×10－2 mol/L浓度范围内与ECL强度呈良好的线性关系：I＝65.4374C+29017， r=0.9987； 检出限为1 μmol/L； 酶电极的响应时间约为10 s。
5、葡萄糖传感器的重现性、稳定性和选择性
通过移除ECL葡萄糖传感器上方的磁铁，用水冲SPCE电极表面，在0.5 mol/L HCl中清洗0.5 min，从而去除磁性复合粒子。重复2.2.2节的修饰过程，可实现磁性复合粒子的更新。每次电极更新后对1.0 mmol/L的葡萄糖进行测定，其RSD=9%（n=5）。而对于5批次相同条件下制得的传感器，其RSD=4.5%。考察一个月内组装有磁性复合粒子的工作电极对葡萄糖响应情况（不使用时，电极放置在4 ℃冰箱中保存）。结果表明，７天内电极响应基本不变，CV和ECL曲线形状也基本不变；１４天后ECL强度约为原来的95%；１月后ECL强度下降85%。显然，用本实验方法固定GOD在Fe3O4纳米粒子表面，能在微环境下保持生物蛋白的活性，从而获得较好的稳定性。考察了一些常见干扰物质对测定5.0×10－5 mol/L葡萄糖的影响。结果表明，10倍的尿酸和抗坏血酸对葡萄糖的检测的影响均<5%，说明本方法选择性好，这归功于酶促反应特异性和ECL的高灵敏度。
